FURG - DCF - BIOFÍSICA

Coleta de Sangue de Rato por Exsanguinação

Objetivo

Obter sangue de ratos por exsanguinação, para ser utilizado em experimentos. Cada rato adulto fornece aproximadamente 10 ml. As quantidades especificadas são para um total de 50 ml de sangue.

 

Material necessário

5 ratos adultos

solução de uretana em água destilada, 100 mg/ml

balança para pesar ratos

seringa e agulha para injeção intraperitonial

suporte para rato anestesiado

algodão

pinça com dentes para pele

tesoura para pele

5 conjuntos de seringa de vidro de 10 ml com agulha 25 X 8

1 ampola de heparina (Liquemine Roche), 0,25 ml=5000 U.I.

solução Ringer ou NaCl 9 g/l

1 béquer de aprox. 20 ml

proveta ou erlenmeyer de 50 ml

 

Procedimento

  1. Preparar diluição da heparina, 1 ampola de Liquemine Roche (0,25 ml=5000 U.I.) em 10 ml de Ringer ou NaCl 9 g/l, dentro de um béquer pequeno. Enxaguar com esta solução cada uma das seringas de vidro com agulha, deixando 1 ml em cada uma.

  2. Pesar o rato e aplicar injeção intraperitonial de solução de uretana, na dose de 50 mg/100 g de peso (são 0,5 ml de solução para 100 g de peso). O rato ficará anestesiado em menos de 5 min.

  3. Colocar o rato no suporte.

  4. Molhar com água os pelos do abdome. Abrir o abdome por uma incisão mediana, utilizando a pinça e a tesoura.

  5. Afastar as vísceras abdominais para a direita do animal, expondo a gordura retroperitonial, atrás da qual se encontra a aorta.

  6. Expor a aorta retirando a gordura retroperitonial com algodão seco.

  7. Puncionar a aorta com a seringa dotada da agulha 25 X 8 e injetar a solução de heparina que nela foi colocada.

  8. Extrair o sangue. Será obtido um volume de 10 ml, aproximadamente.

  9. Retirar a agulha da seringa e colocar o sangue na proveta (ou erlenmeyer).

  10. . Lavar com água imediatamente a seringa e a agulha utilizadas.

 

Este experimento foi adaptado para as disciplinas atendidas pelo Setor de Biofísica do Departamento de Ciências Fisiológicas da Fundação Universidade do Rio Grande pelo Prof. Dr. Jorge Alberto Castro.

Dúvidas:  Prof. Msc. Pedro Carvalho de Castilho.
Colaborou na programação HTML: Glauco César Delevedove.

Página criada em 02/06/98

 
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